फलों के विकास में जीन गन का अनुप्रयोग

चेरी एक फल है जो जलवायु पर अपेक्षाकृत निर्भर है। फलों के विकास के दौरान, इसकी परिपक्वता को एब्सिसिक एसिड (ABA) द्वारा नियंत्रित किया जाता है।

इस अध्ययन में, मीठे मीठे फलों में 8'-हाइड्रॉक्सिलेज़ (ए.बी.ए. के ऑक्सीडेटिव अपचय के लिए एक प्रमुख एंजाइम) को कूटने के लिए चार cDNAs की पहचान करने के लिए एक वायरस-प्रेरित जीन साइलेंसिंग (VIGS) और कण बमबारी विधि का उपयोग किया गया था। डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड) Paccyp707a1-a4

Paccyp707a2 चेरी फल पकने को नकारात्मक रूप से नियंत्रित करता है, और paccyp707a1 सूखा सहनशीलता की मध्यस्थता करता है

वायरस प्रेरित जीन साइलेंसिंग (वीआईजीएस) वायरस को एक लक्ष्य जीन टुकड़ा ले जाने वाले पौधे को संक्रमित करने के लिए संदर्भित करता है, जो अंतर्जात जीन सिलिंग को प्रेरित कर सकता है, फेनोटाइपिक परिवर्तन का कारण बन सकता है, और फिर फ़ेनोटाइपिक विविधता के आधार पर लक्ष्य जीन के कार्य का अध्ययन कर सकता है।

चित्रा 1. एबी चेरी बायोसिंथेसिस (pacnced1), ABA अपचय (paccyp707as) और ABA सामग्री से संबंधित जीन मीठे चेरी फल के विकास और परिपक्वता के दौरान। (ए) फल विकास के दौरान चार pacyp707as के पूर्ण प्रतिलेख स्तर। (बी) विकास के दौरान pcnced1 और aba द्वारा संचित सापेक्ष प्रतिलेख स्तर। एक्टिन को एक आंतरिक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था और इसकी अभिव्यक्ति qrt-pcr द्वारा पाई गई थी।

निर्जलीकरण प्रतिक्रिया में pAccyp707a जीन की अभिव्यक्ति

32 दिनों से एकत्र किए गए फलों को दो समूहों में विभाजित किया गया था, और कम सापेक्ष आर्द्रता (45%) और उच्च सापेक्ष आर्द्रता (100%) की शर्तों के तहत 3 दिनों के लिए भंडारण के बाद पानी की हानि दर 45% सापेक्ष आर्द्रता पर 16% थी। फलों में ABA सामग्री और pNCED1 प्रतिलेखन स्तर नियंत्रण समूह की तुलना में काफी अधिक था। वह नियंत्रित करता है (चित्र 2)। इसके विपरीत, Paccyp707a1 की अभिव्यक्ति को निर्जलीकरण के बाद काफी कम-विनियमित किया गया था, और Paccyp707a3 की अभिव्यक्ति को भी नीचे-विनियमित किया गया था, कुछ हद तक यद्यपि, और Paccyp707a4 और Paccyp707a2 की अभिव्यक्ति निर्जलीकरण (छवि 2) से प्रभावित नहीं थी। सबसे महत्वपूर्ण परिवर्तन paccyp707a1 की अभिव्यक्ति में हुआ, जो फल पकने के दौरान paccyp707a जीन परिवार का प्रमुख सूखा-उत्तरदायी सदस्य हो सकता है।

Paccyp707A2 जीन साइलेंसिंग फल रंगाई और परिपक्वता को बढ़ावा देता है

फल के फेनोटाइप का इलाज Paccyp707A1 / 2-RNAi द्वारा किया गया था। फूलों के बाद 28 वें दिन, अलग-अलग बागों में लगाए गए तीन चेरी के पेड़ों से 90 फलों को चुना गया, और वायरस-प्रेरित जीन सिलिंग प्रयोगों के लिए प्रत्येक 30 के तीन समूहों में विभाजित किया गया।

Paccyp707a1-rnai, paccyp707a2-rnai और नियंत्रण trv वेक्टर (cyp707a जीन के बिना) क्रमशः समूहों 1, 2 और 3 के फल के पेडीकल्स में इंजेक्ट किए गए थे।

टीका लगाने के 7 दिन बाद फल का मूल्यांकन किया गया था।

(ए) फूल के 28 दिनों के बाद फल (डी) का इलाज;

(बी) फल का इलाज करने के लिए 43d;

(सी) फल की 43d ट्रिव वेक्टर उपचार (कोई cyp707a जीन);

(d) 43 डी pacyp707a1 RNAi उपचारित फल;

(ई) फल के paccyp707a2 आरएनएआई उपचार;

(एफ) Paccyp707a2 आरएनएआई ने उपचार के 6 दिन बाद (सही नियंत्रण) फल का इलाज किया;

(छ) paccyp707a1 RNAi फल उपचार के 6 दिन बाद (दाईं ओर फल नियंत्रण)।